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En la anemia hemolítica adquirida y en la eritroblastosis fetal existen anticuerpos de tipo globulinas, adheridos a la membrana del eritrocito. Se denominan anticuerpos incompletos, monovalentes, coaglutinantes, anticuerpos de la albúmina o anticuerpos hiperinmunes. Tienen la propiedad de aglutinar en presencia de un suero antigammaglobulínico, el cual puede ser preparado en conejos o cabras al inyectarles globulina humana, para obtener un suero con anticuerpos contra está globulina.
En recién nacidos Rh positivos de madre Rh negativa, que han desarrollado eritroblastosis fetal o están sensibilizados, sus anticuerpos revisten a los eritrocitos y aglutinan directamente con el suero antigammaglobulínico. Este proceso se denomina prueba de Coombs directa positiva. Situación análoga sucede en pacientes con anemia hemolítica.
También se aprecian pruebas débilmente positivas en los pacientes que tienen un nivel alto de gammaglobulina, como ocurre en la artritis reumatoidea, leucemia, mieloesclerosis, sarcoidosis, lupus eritematoso, anemia aplástica y ocasionalmente paludismo.
La prueba de Coombs directa es de utilidad para detectar anticuerpos fijados a la superficie de los glóbulos rojos, de manera anormal, ocasionando su destrucción y anemia. Esta alteración puede ser ocasionada por algunas enfermedades, incompatibilidad de Rh y medicamentos como quinidina, metildopa y procainamida
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